小鼠细胞系STR检测
CNAS认证
CMA认证
信息概要
小鼠细胞系STR检测是通过分析短串联重复序列(Short Tandem Repeat, STR)来鉴定小鼠细胞系身份和纯度的分子生物学技术。STR位点是小鼠基因组中高度可变的重复序列区域,具有个体特异性,检测这些位点可以准确区分不同来源的小鼠细胞系,防止交叉污染或误认。该检测对于生物医学研究、药物开发和细胞库管理至关重要,能确保实验数据的可靠性和可重复性,避免因细胞系混淆导致的研究失败或资源浪费。概括来说,STR检测提供了一种标准化、高精度的细胞系认证方法。
检测项目
D1Mit3, D2Mit15, D3Mit22, D4Mit12, D5Mit13, D6Mit15, D7Nds2, D8Mit14, D9Mit18, D10Mit14, D11Mit4, D12Mit2, D13Mit1, D14Mit15, D15Mit12, D16Mit4, D17Mit11, D18Mit4, D19Mit2, DXMit16
检测范围
NIH/3T3, L929, RAW264.7, C2C12, HEK293T(小鼠源对照), MC3T3-E1, P19, EL4, S49, WEHI-3, B16-F10, CT26, 4T1, N2a, AtT-20, YAC-1, RMA, MEF, ES细胞系, 杂交瘤细胞系
检测方法
PCR扩增法:利用特异性引物扩增STR位点,通过电泳分离扩增产物。
毛细管电泳法:将PCR产物进行毛细管电泳,根据片段大小分析STR等位基因。
Sanger测序法:对STR区域进行直接测序,提供高精度序列信息。
荧光标记法:使用荧光染料标记引物,便于电泳检测和自动化分析。
多重PCR法:同时扩增多个STR位点,提高检测效率和通量。
基因分型分析法:比较样本STR图谱与数据库,确定细胞系身份。
定量分析法:评估STR位点的峰值高度,检测细胞系混合或污染。
微卫星不稳定性检测:分析STR位点的突变情况,评估细胞遗传稳定性。
DNA提取纯化法:从细胞样本中提取高质量DNA,确保检测准确性。
琼脂糖凝胶电泳法:初步验证PCR扩增效果,检查产物大小。
实时荧光PCR法:结合荧光探针,实时监测STR扩增过程。
下一代测序法:高通量测序STR区域,适用于大规模筛查。
比对数据库法:将结果与国际细胞系数据库(如ATCC)比对进行验证。
质量控制法:包括阳性和阴性对照,确保检测过程可靠。
统计学分析法:使用软件分析STR数据,计算匹配概率和纯度。
检测仪器
PCR仪, 毛细管电泳仪, 测序仪, 荧光显微镜, 凝胶成像系统, 核酸定量仪, 离心机, 水浴锅, 微量分光光度计, 自动液体处理系统, 电泳槽, 恒温培养箱, 生物分析仪, 冰箱, 超净工作台
小鼠细胞系STR检测如何应用于细胞库管理?STR检测通过定期筛查细胞系身份,帮助识别交叉污染,确保细胞库中储存的小鼠细胞系纯正,避免实验误差。
为什么小鼠细胞系STR检测对药物研发很重要?在药物筛选和毒性测试中,STR检测可验证细胞系真实性,防止使用错误细胞导致数据无效,提升研发可靠性。
STR检测能发现小鼠细胞系的遗传漂变吗?是的,通过比较不同传代次数的STR图谱,可以监测遗传漂变,及时采取措施维持细胞系稳定性。