CRISPR筛选毒性靶点高通量验证

信息概要

CRISPR筛选毒性靶点高通量验证是一种利用CRISPR-Cas9技术对潜在毒性靶点进行大规模筛选和验证的服务。该服务通过高通量测序和生物信息学分析，快速鉴定与毒性相关的基因或通路，为药物开发、毒理学研究及生物安全评估提供关键数据。检测的重要性在于能够精准识别毒性靶点，降低药物研发风险，优化治疗方案，并确保生物制品的安全性。

检测项目

基因敲除效率验证，脱靶效应分析，细胞活力检测，凋亡率测定，细胞周期分析，DNA损伤评估，ROS水平检测，线粒体功能检测，炎症因子表达分析，代谢组学分析，转录组测序，蛋白质组学分析，表观遗传修饰检测，信号通路活性评估，细胞迁移能力测试，细胞侵袭能力测试，细胞黏附能力测试，细胞形态学观察，细胞增殖曲线测定，药物敏感性测试

检测范围

肿瘤细胞系，原代细胞，干细胞，免疫细胞，神经细胞，心血管细胞，肝细胞，肾细胞，肺细胞，肠细胞，皮肤细胞，血液细胞，肌肉细胞，骨细胞，生殖细胞，内分泌细胞，上皮细胞，间充质细胞，成纤维细胞，胚胎细胞

检测方法

CRISPR-Cas9基因编辑技术：通过设计sgRNA靶向特定基因，利用Cas9蛋白进行基因敲除或编辑。

高通量测序（NGS）：对编辑后的细胞进行全基因组或靶向测序，分析编辑效率和脱靶效应。

流式细胞术：检测细胞表面标志物、细胞周期、凋亡率等参数。

CCK-8法：通过检测细胞代谢活性评估细胞活力。

Annexin V-FITC/PI双染法：定量分析细胞凋亡情况。

Western Blot：检测特定蛋白的表达水平变化。

qRT-PCR：定量分析基因表达水平。

免疫荧光染色：观察细胞内特定蛋白的定位和表达。

ELISA：检测细胞培养上清中炎症因子或其他分泌蛋白的水平。

代谢组学分析：通过LC-MS或GC-MS技术分析细胞代谢物变化。

转录组测序（RNA-seq）：全面分析基因表达谱的变化。

蛋白质组学分析：通过质谱技术鉴定和定量蛋白质表达差异。

彗星实验：评估DNA损伤程度。

Transwell实验：检测细胞迁移和侵袭能力。

细胞划痕实验：评估细胞迁移能力。

检测仪器

高通量测序仪，流式细胞仪，荧光显微镜，实时荧光定量PCR仪，Western Blot电泳系统，酶标仪，超速离心机，液相色谱-质谱联用仪，气相色谱-质谱联用仪，显微操作仪，细胞培养箱，生物安全柜，倒置显微镜，超微量分光光度计，低温高速离心机

北检院部分仪器展示