分子伴侣活性测试

信息概要

分子伴侣活性测试是一种用于评估分子伴侣蛋白在协助蛋白质折叠、组装和降解过程中功能活性的重要检测项目。分子伴侣蛋白在维持细胞稳态、防止蛋白质错误折叠以及应对应激条件中发挥关键作用。通过检测分子伴侣活性，可以评估其在生物医药、疾病治疗以及工业酶制剂等领域的应用潜力。该检测对于确保产品质量、优化生产工艺以及研究分子机制具有重要意义。

检测项目

ATP酶活性测定, 蛋白质结合能力, 热稳定性测试, 折叠辅助活性, 聚集抑制能力, 底物特异性分析, 动力学参数测定, 荧光标记检测, 分子量测定, 等电点分析, 二硫键稳定性, 疏水性评估, 抗氧化活性, 酶联免疫吸附试验, 圆二色谱分析, 表面等离子共振, 动态光散射, 核磁共振检测, 质谱分析, 电泳迁移率测定

检测范围

热休克蛋白HSP70家族, 热休克蛋白HSP90家族, 小热休克蛋白家族, 伴侣蛋白GroEL/GroES, DnaK/DnaJ/GrpE系统, ClpB/HSP104家族, 泛素-蛋白酶体系统, 蛋白质二硫键异构酶, 肽基脯氨酰异构酶, 线粒体分子伴侣, 内质网分子伴侣, 核定位分子伴侣, 细胞质分子伴侣, 膜结合分子伴侣, 细菌分子伴侣, 古菌分子伴侣, 植物分子伴侣, 动物分子伴侣, 真菌分子伴侣, 病毒分子伴侣

检测方法

等温滴定量热法(ITC)：通过测量分子相互作用过程中的热量变化来评估结合亲和力。

表面等离子共振(SPR)：实时监测分子伴侣与底物蛋白的结合动力学。

荧光共振能量转移(FRET)：利用荧光标记分析分子伴侣与底物的相互作用距离。

动态光散射(DLS)：测定分子伴侣-底物复合物的流体力学半径和聚集状态。

圆二色谱(CD)：分析分子伴侣诱导的底物蛋白二级结构变化。

差示扫描量热法(DSC)：评估分子伴侣对底物蛋白热稳定性的影响。

核磁共振(NMR)：在原子分辨率水平研究分子伴侣与底物的相互作用。

质谱分析(MS)：鉴定分子伴侣结合的底物蛋白及其修饰状态。

凝胶过滤色谱：分离和定量分子伴侣-底物复合物。

酶联免疫吸附试验(ELISA)：定量检测特定分子伴侣蛋白的表达水平。

Western blotting：分析分子伴侣蛋白的表达和修饰状态。

蛋白质热移位分析(TSA)：评估分子伴侣对底物蛋白热稳定性的影响。

蛋白质聚集抑制实验：测定分子伴侣防止底物蛋白聚集的能力。

ATPase活性测定：评估分子伴侣的ATP水解活性。

蛋白质折叠辅助实验：监测分子伴侣促进底物蛋白正确折叠的效率。

检测仪器

等温滴定量热仪, 表面等离子共振仪, 荧光分光光度计, 动态光散射仪, 圆二色谱仪, 差示扫描量热仪, 核磁共振波谱仪, 质谱仪, 高效液相色谱仪, 凝胶成像系统, 酶标仪, Western blotting系统, 实时荧光定量PCR仪, 超速离心机, 电泳系统

北检院部分仪器展示