大肠杆菌O157:H7_invA_基因实时荧光PCR检测是一种高灵敏度、高特异性的分子生物学检测方法,用于快速准确地检测食品、环境样本及临床样本中的大肠杆菌O157:H7。该检测通过特异性扩增invA基因片段,结合荧光信号实时监测,可在短时间内提供可靠的结果。大肠杆菌O157:H7是一种重要的食源性致病菌,其感染可能导致严重的肠道疾病甚至溶血性尿毒综合征(HUS)。因此,及时检测对于食品安全监管、疾病预防和控制具有重要意义。
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实时荧光PCR法:通过特异性引物和探针扩增invA基因片段,实时监测荧光信号。
DNA提取法:使用商业化试剂盒或自配试剂从样本中提取DNA。
样本前处理法:对食品或环境样本进行均质、离心等处理以富集目标菌。
阳性对照法:在检测过程中加入已知阳性样本以确保检测有效性。
阴性对照法:在检测过程中加入已知阴性样本以排除污染。
内标法:在PCR反应中加入内标基因以监控提取和扩增效率。
梯度稀释法:对样本进行梯度稀释以确定检测限。
熔解曲线分析法:通过熔解曲线分析确认扩增产物的特异性。
定量标准曲线法:通过标准曲线对目标基因进行定量分析。
多重PCR法:同时检测多个目标基因以提高检测效率。
快速检测法:优化反应条件以缩短检测时间。
自动化检测法:使用自动化设备完成样本处理和检测。
高通量检测法:通过高通量平台同时检测大量样本。
数字PCR法:通过数字PCR技术提高检测灵敏度和准确性。
等温扩增法:使用等温扩增技术替代传统PCR进行检测。
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