类器官模型肠道毒性屏障功能测试

信息概要

类器官模型肠道毒性屏障功能测试是一种先进的体外检测技术，用于评估药物、化学品或环境污染物对肠道屏障功能的潜在毒性影响。该模型通过模拟人体肠道的生理结构和功能，提供更接近体内环境的实验数据，显著提高药物安全性和毒性预测的准确性。检测的重要性在于帮助研发人员早期识别潜在毒性风险，优化候选化合物，降低临床试验失败率，同时减少动物实验的需求，符合3R原则（替代、减少、优化）。

检测项目

肠道屏障完整性, 紧密连接蛋白表达, 跨上皮电阻（TEER）, 细胞凋亡率, 细胞增殖活性, 炎症因子释放, 氧化应激指标, 黏液层厚度, 微生物易位率, 药物渗透性, 细胞毒性, 基因毒性, 代谢活性, 屏障功能恢复能力, 免疫反应调控, 肠内分泌细胞功能, 细胞骨架完整性, 信号通路激活, 肠道菌群互作, 转录组学分析

检测范围

药物候选化合物, 食品添加剂, 农药残留, 重金属污染物, 纳米材料, 化妆品成分, 环境毒素, 工业化学品, 生物制剂, 抗生素, 益生菌, 天然提取物, 合成高分子材料, 医疗器械浸提液, 致癌物筛查, 内分泌干扰物, 基因治疗载体, 放射性物质, 临床前药物制剂, 疫苗佐剂

检测方法

跨上皮电阻测量法（TEER）：通过电极测量类器官单层的电阻值评估屏障完整性。

荧光标记渗透实验：使用荧光标记分子定量检测肠道屏障的通透性。

免疫荧光染色：定位和定量紧密连接蛋白（如ZO-1、occludin）的表达分布。

实时细胞分析（RTCA）：动态监测毒性引起的细胞形态和贴附变化。

ELISA检测：定量分析炎症因子（如IL-6、TNF-α）的分泌水平。

流式细胞术：测定细胞凋亡、周期和表面标志物表达。

转录组测序（RNA-seq）：全基因组水平分析毒性相关基因表达谱。

代谢组学分析：鉴定毒性作用下的代谢物变化。

扫描电镜（SEM）：观察微绒毛结构和黏液层物理形态。

透射电镜（TEM）：评估超微结构损伤如线粒体肿胀。

彗星实验：检测DNA链断裂程度的基因毒性。

ATP含量检测：反映细胞能量代谢活性。

活性氧（ROS）检测：量化氧化应激水平。

细菌易位模型：评估屏障功能缺陷导致的微生物穿透。

类器官收缩力测定：分析平滑肌细胞功能异常。

检测仪器

TEER测量仪, 荧光显微镜, 共聚焦显微镜, 流式细胞仪, 酶标仪, 实时PCR仪, 高通量测序仪, 液相色谱-质谱联用仪（LC-MS）, 气相色谱仪, 扫描电子显微镜, 透射电子显微镜, 超微量分光光度计, 细胞能量代谢分析仪, 全自动生化分析仪, 微孔板离心机

北检院部分仪器展示