血浆样本基孔肯雅病毒微滴数字PCR测试

信息概要

血浆样本基孔肯雅病毒微滴数字PCR测试是一种高灵敏度、高特异性的分子检测技术，专用于检测血浆中的基孔肯雅病毒核酸。该技术通过微滴分割样本，结合荧光信号分析，实现对病毒核酸的绝对定量，检测限低至单拷贝级别。该检测对早期感染诊断、疫情监测和疗效评估具有重要意义，尤其适用于旅行医学、出入境检疫及流行病学研究等领域。

检测项目

基孔肯雅病毒RNA定量检测，病毒载量分析，阳性对照检测，阴性对照检测，内参基因检测，检测限验证，精密度测试，重复性测试，特异性测试，灵敏度测试，交叉反应验证，样本稳定性测试，抑制剂检测，扩增效率评估，标准曲线建立，阈值设定，微滴生成分析，荧光信号阈值校准，数据质控分析，结果判读标准验证

检测范围

临床疑似感染者血浆，无症状筛查样本，疫区入境人员样本，献血者筛查样本，疫苗接种后监测样本，流行病学调查样本，康复期患者随访样本，野生动物宿主样本，蚊媒携带病毒检测样本，冷链环境样本，跨境运输人员样本，航空器废弃物样本，边境检疫样本，应急储备样本，科研机构留存样本，生物制品原料样本，移植供体筛查样本，职业暴露人群样本，旅行医学检测样本，疫情暴发区环境样本

检测方法

微滴生成技术：通过油相水相系统将反应体系分割为数万个微滴

荧光探针法：采用TaqMan水解探针标记目标序列

绝对定量分析：通过泊松分布统计计算目标分子拷贝数

数字PCR扩增：在微滴内进行终点法PCR扩增

微滴读取技术：使用双色荧光通道检测阳性微滴

阈值设定方法：通过阴性对照群集确定信号阈值

标准曲线法：使用已知浓度标准品建立定量关系

内参校准技术：引入管家基因进行样本质量控制

抑制剂检测方法：通过内参基因Ct值偏移评估抑制效应

交叉反应验证：检测相近病毒核酸确保特异性

灵敏度测试：系列稀释标准品确定检测下限

精密度验证：重复检测同一样本评估变异系数

稳定性测试：不同保存条件下样本重复检测

数据分析算法：采用泊松校正公式计算绝对浓度

质控标准建立：通过阴性阳性对照确定实验有效性

检测仪器

微滴数字PCR系统，微滴生成仪，PCR扩增仪，微滴分析仪，荧光显微镜，核酸提取仪，生物安全柜，超低温离心机，微量分光光度计，恒温金属浴，振荡混合器，超纯水系统，电子天平，移液器校准仪，生物芯片阅读器，全自动液体处理工作站

北检院部分仪器展示