l-5甲基四氢叶酸钙检测标准

L-5-甲基四氢叶酸钙检测标准

一、检测范围 L-5-甲基四氢叶酸钙（L-5-MTHF-Ca）的检测适用于原料药、制剂（如片剂、胶囊、注射液）、食品强化剂、保健品及生物样本中的含量测定与质量控制。检测涵盖纯度分析、杂质检查、稳定性研究以及生产过程监控。

二、检测项目

1. 主成分含量测定：L-5-MTHF-Ca的定量分析。
2. 有关物质检测：包括异构体、降解产物（如四氢叶酸、10-甲酰基四氢叶酸）及其他杂质。
3. 残留溶剂检测：如甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂残留。
4. 微生物限度：需氧菌、霉菌、酵母菌及特定致病菌的检测。
5. 理化性质分析：pH值、水分、重金属（如铅、砷、镉）、炽灼残渣等。

三、检测仪器

1. 高效液相色谱仪（HPLC）：配备紫外检测器或二极管阵列检测器（DAD），用于主成分含量和杂质分析。
2. 气相色谱仪（GC）：用于残留溶剂检测。
3. 紫外-可见分光光度计：辅助定量分析及特定波长下的吸光度测定。
4. 质谱仪（LC-MS/MS）：用于复杂基质中痕量杂质的定性与定量。
5. 微生物培养箱及菌落计数器：微生物限度检测。
6. 总有机碳分析仪（TOC）：注射剂中不溶性微粒检测（若适用）。
7. pH计、水分测定仪：理化性质分析。

四、检测方法

1. 主成分含量测定（HPLC法）

   • 色谱条件：
     • 色谱柱：C18反相色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）。
     • 流动相：乙腈-磷酸盐缓冲液（pH 3.0）（10:90，v/v）。
     • 流速：1.0 mL/min；检测波长：280 nm；柱温：30℃。
   • 样品处理：精密称取样品，用纯水溶解并稀释至适宜浓度，经0.45 μm滤膜过滤后进样。

2. 有关物质检测（HPLC梯度洗脱法）

   • 梯度程序：初始流动相乙腈-缓冲液（5:95），15分钟内线性增至乙腈-缓冲液（25:75）。
   • 系统适用性：主峰与相邻杂质峰分离度≥1.5，理论塔板数≥2000。

3. 残留溶剂检测（GC顶空进样法）

   • 色谱条件：DB-624毛细管柱（30 m×0.53 mm，3 μm），载气为氮气，FID检测器。
   • 顶空参数：平衡温度80℃，平衡时间30分钟。

4. 微生物限度检测

   • 按《中国药典》通则1105/1106进行，采用薄膜过滤法或平皿法，培养温度3035℃（细菌）及2025℃（真菌），培养时间5~7天。

5. 水分测定（卡尔费休法）

   • 使用库仑法水分测定仪，样品溶解于无水甲醇，直接滴定至终点。

6. 重金属检测（ICP-MS法）

   • 样品经微波消解后，采用电感耦合等离子体质谱仪测定铅、砷、镉等元素，内标法定量。

注：所有检测需符合《中国药典》或ICH指导原则要求，实验数据需经方法学验证（包括线性、精密度、准确度、专属性等）。

北检院部分仪器展示