田间毒株PRRSV MLV疫苗株鉴别PCR测试

信息概要

田间毒株PRRSV MLV疫苗株鉴别PCR测试是针对猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）野毒株与弱毒活疫苗株进行精准区分的分子诊断技术。该检测通过特异性引物扩增病毒基因组特征区域，结合实时荧光定量PCR及序列比对分析，可有效识别疫苗株与田间流行毒株的遗传差异。检测重要性体现在：1）辅助养殖场精准评估疫苗免疫效果及病毒循环状态；2）为疫病防控策略制定提供科学依据；3）监测疫苗株变异风险及田间毒株演化趋势；4）降低因误判导致的生物安全漏洞。

检测项目

病毒类型鉴别,ORF5基因序列分析,Nsp2基因缺失检测,疫苗株特异标记物筛查,野毒株毒力因子检测,病毒载量测定,疫苗株稳定性评估,跨物种传播风险分析,疫苗株与野毒株混合感染判定,病毒遗传进化关系推导,疫苗株返祖风险监测,病毒血症持续期检测,疫苗株组织嗜性分析,野毒株致病性预测,疫苗株免疫原性验证,病毒株宿主适应性评估,疫苗株与野毒株重组风险筛查,病毒株耐药性相关位点检测,疫苗株环境存活能力测定,野毒株传播途径追踪

检测范围

经典PRRSV毒株,高致病性PRRSV变异株,PRRSV-1型疫苗株,PRRSV-2型疫苗株,类NADC30毒株,类NADC34毒株,类VR-2332毒株,类LV毒株,疫苗株衍生变异株,疫苗株与野毒株重组毒株,猪源PRRSV分离株,野禽源PRRSV疑似株,疫苗株环境残留毒株,疫苗株细胞培养适应株,疫苗株返强突变体,疫苗株交叉保护型毒株,疫苗株非靶向宿主感染株,疫苗株耐热突变体,疫苗株减毒稳定性毒株,疫苗株基因缺失修饰株

检测方法

实时荧光定量PCR：通过特异性探针检测病毒特征基因拷贝数

多重PCR：同时扩增多个靶标基因实现快速分型

逆转录PCR：将RNA病毒反转录为cDNA后进行扩增分析

巢式PCR：增强低浓度样本检测灵敏度

数字PCR：绝对定量病毒载量及疫苗株占比

限制性片段长度多态性分析：通过酶切图谱区分毒株类型

基因测序与比对：解析病毒基因组特征位点

单克隆抗体结合PCR：增强抗原表位特异性检测

微流控芯片PCR：高通量并行检测多靶标

等温扩增技术：缩短检测时间至1小时内

质谱法基因分型：基于质量差异鉴别SNP位点

流式细胞术联用PCR：分析病毒宿主细胞嗜性

宏基因组测序：无偏倚检测混合感染毒株

逆转录环介导等温扩增：可视化快速检测

荧光熔解曲线分析：基于Tm值区分序列差异

检测仪器

ABI 7500实时荧光PCR仪,QIAGEN Rotor-Gene Q,LightCycler 480,Bio-Rad CFX96,TaqMan Array Card,Agilent 2100生物分析仪,Thermo NanoDrop微量分光光度计,Illumina MiSeq测序仪,Thermo KingFisher核酸提取仪,Applied Biosystems 3500遗传分析仪,Hamilton Nimbus液体工作站,Fluidigm Biomark HD系统,Stellaris荧光显微成像系统,Agilent 1290 Infinity II HPLC,PerkinElmer EnSpire多功能酶标仪

北检院部分仪器展示