角膜模型(HCE)眼刺激性测试(OECD 492)是一种基于人工角膜模型的体外眼刺激性评估方法,用于替代传统的动物实验。该测试通过模拟人眼角膜的结构和功能,评估化学品或产品对眼睛的潜在刺激性。检测的重要性在于其符合国际动物福利要求,同时提供高效、可靠的实验结果,广泛应用于化妆品、药品、化学品等行业,确保产品安全性并满足法规合规性。
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细胞活性检测(MTT法):通过MTT试剂测定细胞代谢活性,评估刺激性。
乳酸脱氢酶(LDH)释放测定:检测细胞膜完整性及细胞毒性。
炎症因子ELISA检测:定量分析炎症介质的释放水平。
实时荧光定量PCR:评估基因表达变化,分析刺激性机制。
角膜透明度测定:通过光学设备测量角膜模型的透光率。
细胞形态学观察:显微镜下观察细胞形态变化,评估损伤程度。
屏障功能检测:测量跨上皮电阻(TEER),评估角膜屏障完整性。
氧化应激指标测定:检测活性氧(ROS)水平,评估氧化损伤。
蛋白质印迹(Western Blot):分析特定蛋白表达,研究刺激性通路。
细胞凋亡检测:通过流式细胞术或荧光染色评估凋亡率。
角膜厚度测量:使用显微测量设备评估角膜模型的物理变化。
细胞迁移实验:评估角膜修复能力及细胞迁移速率。
代谢活性测定:通过ATP含量检测细胞能量代谢状态。
基因芯片分析:高通量筛选刺激性相关基因表达谱。
角膜水肿评估:测量角膜模型的水肿程度,分析刺激性影响。
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