表面等离子共振（SPR）抗体亲和力测定

信息概要

表面等离子共振（SPR）抗体亲和力测定是一种基于光学原理的高通量生物分子相互作用分析技术，广泛应用于抗体药物研发、生物标志物发现及免疫学研究中。该技术通过实时监测分子结合与解离过程，精准测定抗体与抗原之间的亲和力（KD值）、结合速率（ka）和解离速率（kd），为药物筛选和优化提供关键数据。检测的重要性在于其无需标记、高灵敏度及实时动态分析能力，可显著加速抗体药物的临床前评估，确保候选药物的有效性与安全性。

检测项目

亲和力常数（KD）, 结合速率常数（ka）, 解离速率常数（kd）, 最大响应值（Rmax）, 特异性结合分析, 非特异性结合评估, 多价相互作用分析, 浓度依赖性测试, 温度影响评估, pH依赖性测试, 缓冲液兼容性, 稳定性测试, 竞争性结合实验, 表位定位分析, 动力学曲线拟合, 稳态分析, 重复性验证, 批次间一致性, 交叉反应性测试, 药物-靶标相互作用

检测范围

单克隆抗体, 多克隆抗体, 重组抗体, 人源化抗体, 嵌合抗体, 纳米抗体, 双特异性抗体, ADC药物, 抗体片段（Fab/Fv/scFv）, 融合蛋白, 疫苗抗原, 细胞因子, 受体蛋白, 配体蛋白, 小分子化合物, 核酸适配体, 病毒颗粒, 细菌表面蛋白, 膜蛋白, 糖基化蛋白

检测方法

直接结合法：固定抗原或抗体于芯片表面，直接检测配对分子的结合动力学。

竞争抑制法：通过竞争性分子评估抗体表位特异性或药物抑制效率。

多循环动力学分析：多次进样分析不同浓度样品，提高动力学参数准确性。

单循环动力学分析：单次进样结合不同浓度梯度，缩短实验时间。

表位分型：通过多抗体竞争确定抗原表位重叠区域。

稳态亲和力分析：在平衡状态下计算KD值，适用于低亲和力分子。

pH扫描法：评估pH变化对结合活性的影响。

温度梯度法：分析温度依赖性相互作用。

缓冲液筛选：优化检测条件以减少非特异性结合。

再生条件优化：确定芯片表面再生方案，保证重复使用性。

高通量筛选：自动化并行检测多个样品，提升效率。

浓度滴定：通过系列稀释确定最佳检测浓度范围。

对照参比法：使用标准品校正数据，确保结果可比性。

数据归一化：消除基线漂移或仪器波动影响。

质量控制（QC）验证：通过标准样品验证系统性能。

检测仪器

Biacore T200, Biacore 8K, Biacore X100, Reichert SR7500DC, OpenSPR, Sierra SPR32, SensiQ Pioneer, ProteOn XPR36, IBIS MX96, Plexera KX5, Nicoya Lifesciences OpenSPR XT, Bruker Sierra SPR Pro, Carterra LSA, Malvern Panalytical Creoptix WAVE, BioNavis MP-SPR

北检院部分仪器展示