羧甲基赖氨酸 标准参考

检测范围

羧甲基赖氨酸（CML）的检测主要应用于以下领域：

1. 食品领域：高温加工食品（如烘焙、油炸食品）、乳制品、婴幼儿配方奶粉等。
2. 生物医学领域：糖尿病、肾病等慢性疾病患者的血液、尿液及组织样本。
3. 药品与营养品：评估药品稳定性或营养补充剂中晚期糖基化终末产物（AGEs）的生成量。
4. 科学研究：食品加工工艺优化、抗AGEs药物开发及相关代谢机制研究。

检测项目

1. 食品中CML的定性及定量分析：检测加工食品中CML的生成量，评估热加工对食品品质的影响。
2. 生物样本中CML浓度测定：分析血清、尿液或组织中的CML水平，用于疾病诊断或病理研究。
3. 加工条件对CML生成的影响：研究温度、时间、pH值等因素与CML含量的相关性。
4. CML代谢产物的检测：鉴定CML在体内的代谢途径及相关衍生物。
5. CML与疾病关联性分析：探索CML在氧化应激、炎症反应中的作用机制。

检测仪器

1. 高效液相色谱仪（HPLC）：配备荧光检测器或二极管阵列检测器（DAD），用于分离和定量CML。
2. 液相色谱-质谱联用仪（LC-MS/MS）：高灵敏度检测复杂基质中的痕量CML。
3. 酶联免疫吸附测定仪（ELISA）：基于特异性抗体的快速筛查方法。
4. 气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）：适用于衍生化后CML的定性与定量分析。
5. 紫外-可见分光光度计：辅助检测CML的显色反应或衍生化产物。

检测方法

1. 样品前处理

   • 食品样本：粉碎后经脱脂、酸水解或酶解处理，释放结合态CML，固相萃取（SPE）纯化。
   • 生物样本：离心去除蛋白质，超滤或透析法分离小分子化合物。

2. HPLC法

   • 色谱柱：C18反相色谱柱（4.6 mm × 250 mm, 5 μm）。
   • 流动相：乙腈-水（含0.1%三氟乙酸），梯度洗脱。
   • 检测波长：激发波长340 nm，发射波长455 nm（荧光检测）。

3. LC-MS/MS法

   • 离子源：电喷雾电离（ESI），正离子模式。
   • 监测离子对：CML特征离子m/z 205→130（定量离子）、205→84（定性离子）。
   • 内标法校准：采用同位素标记的d4-CML作为内标。

4. ELISA法

   • 包被CML特异性单克隆抗体，加入样本后孵育，洗涤后加入酶标二抗，显色后测定吸光度（450 nm）。
   • 标准曲线范围：0.1–100 ng/mL。

5. 分光光度法

   • 基于邻苯二甲醛（OPA）衍生化反应，测定衍生物在335 nm处的吸光度值。

参考标准：GB 5009.X-20XX《食品中羧甲基赖氨酸的测定》、AOAC Official Method 20XX.XX。

北检院部分仪器展示