蛋白质热稳定性检测

信息概要

蛋白质热稳定性检测是评估蛋白质在高温条件下的结构稳定性和功能保持能力的重要技术。该检测广泛应用于生物制药、酶工程、食品科学等领域，对于蛋白质药物的开发、工业酶制剂的优化以及食品蛋白质的功能性研究具有关键意义。通过热稳定性检测，可以筛选出高稳定性的蛋白质变体，提高产品的储存稳定性和应用性能，同时为蛋白质的改造和设计提供科学依据。

检测项目

熔点温度（Tm）, 热变性焓（ΔH）, 热变性熵（ΔS）, 热变性中点温度（T1/2）, 热变性速率常数（k）, 热稳定性指数（TSI）, 热诱导聚集温度（Tagg）, 热变性可逆性, 热变性动力学参数, 热变性自由能（ΔG）, 热变性协同性, 热变性二级结构变化, 热变性三级结构变化, 热变性四级结构变化, 热变性荧光信号变化, 热变性圆二色谱变化, 热变性红外光谱变化, 热变性动态光散射变化, 热变性差示扫描量热变化, 热变性电泳迁移率变化

检测范围

抗体药物, 酶制剂, 疫苗, 重组蛋白, 细胞因子, 激素, 血浆蛋白, 膜蛋白, 核蛋白, 糖蛋白, 脂蛋白, 金属蛋白, 荧光蛋白, 毒素蛋白, 结构蛋白, 信号蛋白, 转运蛋白, 受体蛋白, 伴侣蛋白, 融合蛋白

检测方法

差示扫描量热法（DSC）：通过测量蛋白质在升温过程中吸收的热量变化，确定其热变性温度（Tm）和热力学参数。

圆二色谱法（CD）：通过监测蛋白质在升温过程中二级结构的变化，评估其热稳定性。

荧光光谱法：利用蛋白质内源荧光或外源荧光探针，检测热变性过程中的荧光信号变化。

动态光散射（DLS）：通过测量蛋白质在升温过程中的粒径变化，评估其聚集行为。

静态光散射（SLS）：用于分析蛋白质在热变性过程中的分子量和聚集状态。

红外光谱法（FTIR）：通过检测蛋白质酰胺键的红外吸收变化，分析其二级结构的热稳定性。

核磁共振（NMR）：通过监测蛋白质在升温过程中的核磁信号变化，研究其热稳定性和结构动态。

电泳法（SDS-PAGE）：通过分析蛋白质在热处理后的电泳迁移率变化，评估其热变性程度。

表面等离子体共振（SPR）：用于研究蛋白质与配体结合的热稳定性。

等温滴定量热法（ITC）：通过测量蛋白质在恒定温度下的热效应，分析其热稳定性。

微量热泳动（MST）：通过检测蛋白质在温度梯度中的迁移行为，评估其热稳定性。

热梯度凝胶电泳（TGGE）：通过分析蛋白质在不同温度下的电泳行为，评估其热稳定性。

热稳定性芯片（TSA）：利用高通量芯片技术，快速筛选蛋白质的热稳定性。

热诱导聚集测定：通过测量蛋白质在升温过程中的浊度变化，评估其聚集倾向。

热变性动力学分析：通过监测蛋白质在不同温度下的变性速率，计算其热变性动力学参数。

检测仪器

差示扫描量热仪, 圆二色谱仪, 荧光分光光度计, 动态光散射仪, 静态光散射仪, 红外光谱仪, 核磁共振仪, 电泳系统, 表面等离子体共振仪, 等温滴定量热仪, 微量热泳动仪, 热梯度凝胶电泳系统, 热稳定性芯片分析仪, 紫外-可见分光光度计, 高效液相色谱仪

北检院部分仪器展示